Análise por CLAE da ciclosporina contida em amostras de pele provenientes de estudos de penetração cutânea in vitro

Resumo

Neste estudo foi desenvolvido um método simples utilizando Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) com detecção no UV para quantificação de Ciclosporina A (CysA) em amostras de pele após estudos de penetração cutânea in vitro. O peptídeo foi extraído do estrato córneo e da epiderme sem estrato córneo + derme ([E+D]) através de agitação em vórtex e sonicação utilizando um solvente extrator (metanol). A recuperação da CysA de ambas as camadas da pele foi de 85%, conforme estimado por CLAE utilizando coluna RP-18, detecção em 210 nm e fase móvel composta de acetonitrila e água (67:33, v/v). O limite de quantificação do peptídeo utilizando este método cromatográfico foi de 150 ng/mL. O método mostrou-se linear na faixa de 0,15-500 mig/mL. A precisão e exatidão intra e inter-ensaio foram avaliadas utilizando três concentrações distintas (1, 10 e 20 mig/mL). Os valores de coeficiente de variação e o desvio do valor teórico foram inferiores a 5%. O método descrito pode ser utilizado para determinação da CysA após estudos de penetração cutânea in vitro utilizando pele de porco como modelo de membrana